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肝素親和柱升級(jí)揭秘GB 5009.299-2024食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中乳鐵蛋白的測(cè)定
更新時(shí)間:2025-08-07
點(diǎn)擊次數(shù):340
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品貨號(hào) | BAC50020-12 |
產(chǎn)品名稱(chēng) | Heparin Immunoaffinity column |
產(chǎn)品描述 | 12mL, 20/Pk |
產(chǎn)品亮點(diǎn)
?至純至簡(jiǎn):100%遵循GB 5009.299-2024前處理步驟,12 mL大體積柱管,無(wú)需輔助即可實(shí)現(xiàn)一步上樣,保證流速,減少堵塞,讓標(biāo)準(zhǔn)操作變得更加順暢;
?穩(wěn)收雙高:緩沖液添加回收率>95%,RSD<5%;
?艾飛雙行:艾杰爾肝素親和柱+飛諾美Jupiter C4液相色譜柱的黃金搭檔,輕松助力乳鐵蛋白的測(cè)定。
產(chǎn)品參數(shù)

?儲(chǔ)存條件:肝素親和柱需在2-8℃條件下儲(chǔ)存,不得冷凍。
?保質(zhì)期:在最佳保存溫度條件下,產(chǎn)品有效期18個(gè)月(蛋白提取試劑有效期6個(gè)月)。
?注意事項(xiàng):為保證最佳回收率,使用前,肝素親和柱及待檢樣品需于18-25℃回溫。
樣品前處理方法

?稱(chēng)量:稱(chēng)取5g(精確至0.01g)巴氏殺菌乳(巴氏奶)試樣于燒杯中,加標(biāo);
?提取:加入適量磷酸鹽緩沖液Ⅱ提取,分次將樣品轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶,用磷酸鹽緩沖液Ⅱ定容至刻度,充分混勻后轉(zhuǎn)入離心管,在4℃條件下10000r/min離心8min,取樣液10mL 待凈化。
*肝素親和柱使用前要恢復(fù)至室溫(25℃)
?活化:肝素親和柱使用前先將柱中保護(hù)液放掉,后加入5.0mL 磷酸鹽緩沖液Ⅱ活化;
?上樣:準(zhǔn)確將10.0mL樣液過(guò)柱,控制流速在1mL/min~3mL/min;
?淋洗:用10.0mL 磷酸鹽緩沖液Ⅱ淋洗,棄去流出液,用吸水紙擦拭干凈柱管內(nèi)壁殘留液體;
?洗脫:5.0mL磷酸鹽緩沖液Ⅰ洗脫,不要抽干;
?濃縮:收集洗脫液并用磷酸鹽緩沖液Ⅰ定容至5.00mL,過(guò)0.45μm PES水相針頭濾膜,上機(jī)待測(cè)。
色譜分析條件

?色譜柱:Jupiter C4 4.6×250mm 5μm 300?;P/No: 00G-4167-E0
?流動(dòng)相:A:0.1%三氟-乙酸水溶液;B:乙腈;
?流 速:1.0 mL/min;
?柱 溫:30 ℃;
?進(jìn)樣量:50 μL;
?梯度條件:

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

?標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):
準(zhǔn)確移取牛乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)中間溶液,用磷酸鹽緩沖液Ⅰ稀釋定容,配制成濃度分別為 1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液,臨用現(xiàn)配。以物質(zhì)峰面積響應(yīng)值為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

實(shí)驗(yàn)譜圖


實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)


*注:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)為扣除空白后結(jié)果
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